利用基因定点修饰技术CRISPR-Cas系统，可快速地在单倍体干细胞上进行定位的基因修饰或敲除，并且处理后的细胞仍能维持单倍体和多能性状态。尤为重要的是，该工作证明了大鼠单倍体胚胎干细胞同样具有替代精子与卵母细胞“受精”并产生健康大鼠的能力。 单倍体胚胎干细胞同时具有单倍体细胞和胚胎干细胞的特性，由于其只含有一套染色体，不存在等位基因在基因功能上的补偿作用，因此是研究隐性基因功能的理想模型。同时，其胚胎干细胞的特性又可以将基因修饰直接遗传给后代，从而避免了其他转基因方法种系嵌合等方面的要求，可以极大提高基因修饰的效率及应用范围。 通过种系嵌合和替代精子进行卵胞质注射两种途径，该团队都成功获得了健康的携带基因修饰的大鼠，从而证明大鼠孤雄单倍体胚胎干细胞可以将基因修饰快速地遗传给后代，为研究基因功能提供了便利。 此外，也对*大鼠ELISA试剂盒进行了研究，应用双抗体夹心法测定标本中大鼠性激素结合球蛋白（SHBG）elisa试剂盒 水平。用纯化的大鼠性激素结合球蛋白（SHBG）elisa试剂盒使用说明书抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入类性激素结合球蛋白（SHBG）elisa试剂盒 ，再与HRP标记的类性激素结合球蛋白（SHBG）elisa试剂盒 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的类性激素结合球蛋白（SHBG）elisa试剂盒 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠性激素结合球蛋白（SHBG）elisa试剂盒 浓度。 此次的研究成果从小鼠之外的哺乳动物中获得了具有发育功能的单倍体胚胎干细胞系，而且利用CRISPR-Cas技术完成对大鼠单倍体胚胎干细胞的多基因敲除，为建立用于大规模基因筛选的纯合的基因突变细胞库打下基础。鉴于大鼠在生理上比小鼠更类似于人类，这一工作将对人类疾病模型研发和开展基因功能研究起到重要的推动作用。 |
