| 制品内容 （250 U） |
| 核酸外切酶I（20U/μl） | 50 μl | | 热敏磷酸酶（5U/μl） | 100 μl | | 10× AP Buffer | 1000 μl | |
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| · 制品说明 |
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| 对PCR产物的测序通常需要对PCR产物进行胶回收、柱纯化等处理，不仅成本高，费事，而且还必然损失一定量的产物。在PCR产物不易获得的情况下，采用以上方法往往会使实验的费用和时间成倍增加。如果能对PCR产物直接测序将解除这些烦恼。 SinoBio提供的免回收PCR产物测序纯化试剂盒利用核酸外切酶I和热敏碱性磷酸酶，仅需简单的保温步骤，方便地去除去除多余的引物和dNTPs，净化的PCR产物可直接用于测序反应，且不会损失任何产物。此法可以避免繁琐的胶回收、柱纯化、沉淀、磁珠、过滤、透析等方法，大大节省实验费用及时间。 | | | |
| · 用 途 |
| 适用于大规模PCR产物净化测序，大幅提高实验效率，节省实验费用及时间。 |
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| · 产品特点 |
PCR反应结束后，由于产物里一般还残留着引物和及dNTPs，这些残留物会阻碍测序反应的进行，如果去除它们，就可以实现对PCR产物的直接测序。热敏碱性磷酸酶可以分解残余的dNTP，而核酸外切酶I可高特异性地分解单链DNA，而对双链DNA无作用。用这两种酶对PCR产物进行“净化”后，可*降解残留引物及dNTPs，随后的80°C保温过程*灭活核酸外切酶I和热敏碱性磷酸酶，使净化后的产物可直接用于测序反应。
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| · 质量保证 |
| 经测试，经本试剂盒净化的PCR产物可直接用于测序反应。? |
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| · 使用建议 |
1、取出7.5 μl PCR反应混合物；
2、在反应混合物中加入0.5 μl （10 units）的核酸外切酶 I （20,000 units/ml）,37°C反应15分钟;
3、再加入1μl的10× AP Buffer 和1μl （5 units）热敏磷酸酶，37°C反应15分钟;如果反应时间延长，可减少酶用量，需试验验证。
4、热失活核酸外切酶 I和热敏磷酸酶:80°C保温20分钟，终止反应。反应物可直接用于测序。 |
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